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原來(lái)探針?lè)晒釶CR檢測(cè)試劑盒是利用了這一原理進(jìn)行檢測(cè)的
更新時(shí)間:2022-03-11   點(diǎn)擊次數(shù):984次
  原來(lái)探針?lè)晒釶CR檢測(cè)試劑盒是利用了這一原理進(jìn)行檢測(cè)的
  熒光定量PCR的基本原理就是在PCR擴(kuò)增過(guò)程中,隨著PCR循環(huán)數(shù)的遞增,PCR產(chǎn)物不斷積累,熒光信號(hào)也會(huì)相應(yīng)的增加,這樣就可以通過(guò)熒光強(qiáng)度的變化來(lái)對(duì)PCR反應(yīng)進(jìn)行實(shí)時(shí)的監(jiān)測(cè)。探針?lè)晒釶CR檢測(cè)試劑盒通過(guò)對(duì)DNA或RNA的熒光定量PCR監(jiān)測(cè),可以實(shí)現(xiàn)基因的相對(duì)定量、定量和定性分析。
  熒光是指一種光致發(fā)光的冷發(fā)光現(xiàn)象。當(dāng)某種常溫物質(zhì)經(jīng)某種波長(zhǎng)的入射光照射,吸收光能后進(jìn)入激發(fā)態(tài),并且立即退激發(fā)并發(fā)出比入射光的波長(zhǎng)長(zhǎng)的出射光。其原理為:光照射到某些原子時(shí),光的能量使原子核周圍的一些電子由原來(lái)的軌道躍遷到了能量更高的軌道,即從基態(tài)躍遷到第一激發(fā)單線態(tài)或第二激發(fā)單線態(tài)等。第一激發(fā)單線態(tài)或第二激發(fā)單線態(tài)等是不穩(wěn)定的,所以會(huì)恢復(fù)基態(tài),當(dāng)電子由第一激發(fā)單線態(tài)恢復(fù)到基態(tài)時(shí),能量會(huì)以光的形式釋放,所以產(chǎn)生熒光。與傳統(tǒng)PCR一樣,探針?lè)晒釶CR檢測(cè)試劑盒反應(yīng)在溫度模塊里循環(huán)進(jìn)行;理論上每經(jīng)過(guò)一個(gè)循環(huán)目的基因的數(shù)量都會(huì)增加一倍;每個(gè)循環(huán)結(jié)束后,定量PCR儀器通過(guò)不同的濾光片記錄熒光信號(hào);在擴(kuò)增過(guò)程中,熒光信號(hào)隨著PCR產(chǎn)物的增加而增強(qiáng)。
  探針?lè)晒釶CR檢測(cè)試劑盒探針?lè)ǖ谋举|(zhì)是利用了熒光共振能量轉(zhuǎn)移現(xiàn)象,探針上存在一對(duì)能產(chǎn)生熒光共振能量轉(zhuǎn)移的基團(tuán),利用PCR反應(yīng)中的一些過(guò)程(酶切,雜交等),使兩個(gè)基團(tuán)的距離產(chǎn)生變化,使系統(tǒng)中的熒光強(qiáng)度或者熒光種類發(fā)生變化,這種變化又與PCR產(chǎn)物的種類和量有直接關(guān)系,通過(guò)檢測(cè)這種變化,我們就可以檢測(cè)出PCR反應(yīng)體系中產(chǎn)物的種類和量。
 

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